人細(xì)胞ELISA試劑盒的檢測原理主要基于酶聯(lián)免疫吸附測定技術(shù)。ELISA是一種廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷的免疫學(xué)檢測方法，用于定量或定性分析液體樣本中的抗原、抗體或蛋白質(zhì)。
 

　　人細(xì)胞ELISA試劑盒的檢測過程大致如下：
 

　　1、包被：首先將針對目標(biāo)抗原的特異性捕獲抗體固定在微孔板的各個孔內(nèi)壁上，形成一層抗體膜。
 

　　2、封閉：為了避免非特異性結(jié)合，需要用封閉液填充未被捕獲抗體占據(jù)的位點(diǎn)。
 

　　3、加樣：將含有待測抗原的樣本加入到包被有捕獲抗體的孔中，抗原會與捕獲抗體特異性結(jié)合。
 

　　4、洗滌：去除未結(jié)合的物質(zhì)，通常使用洗滌緩沖液多次清洗。
 

　　5、加入檢測抗體：加入針對同一抗原的另一表位的酶標(biāo)記檢測抗體，該抗體與抗原結(jié)合形成“夾心”復(fù)合物。
 

　　6、再次洗滌：去除未結(jié)合的檢測抗體。
 

　　7、顯色：加入酶的底物，酶標(biāo)記的檢測抗體會催化底物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，生成可見的顏色產(chǎn)物。
 

　　8、終止反應(yīng)：根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計，可能需要加入終止液來停止顏色的發(fā)展。
 

　　9、讀數(shù)：使用酶標(biāo)儀測量每個孔的光密度(OD值)，該值與樣本中抗原的濃度成正比。
 

　　通過與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較，可以計算出樣本中抗原的濃度。ELISA試劑盒通常會提供一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品，以建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
 

　　人細(xì)胞ELISA試劑盒的優(yōu)點(diǎn)包括靈敏度高、特異性強(qiáng)、操作相對簡單、可同時處理大量樣本等。然而，ELISA結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性受到多種因素的影響，包括抗體的質(zhì)量、樣本的處理和儲存條件、實(shí)驗(yàn)操作的標(biāo)準(zhǔn)化等。因此，在進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)時，需要嚴(yán)格按照說明書的要求操作，并采取適當(dāng)?shù)馁|(zhì)量控制措施。